Modulation de la signalisation calcique, par des approches de chémogénétique, dans la physiopathologie de l’hyperaldostéronisme primaire

Introduction Ces dernieres annees, des mutations somatiques et germinales dans des canaux potassiques et ATPases ont ete identifiees dans l’hyperaldosteronsime primaire (HAP), faisant de l’HAP une canalopathie. Ces mutations convergent vers une stimulation de la signalisation calcique, principal effecteur de la regulation de la biostynthese d’aldosterone. L’objectif de ce projet est de decortiquer les mecanismes sous-jacents au developpement de l’HAP en modulant la signalisation calcique, par l’utilisation d’outils de chemogenetique. Materiel et methodes Des lignees de cellules corticosurrenaliennes H295R_S2, exprimant de facon stable des recepteurs chimeriques (PSAM, Pharmacologically Selective Actuator Modules) ont ete generees. Dans ces lignees, l’entree de calcium ou de sodium dans la cellule peut etre modulee par l’utilisation d’activateurs specifiques (PSEM, Pharmacologically Selective Effector Molecule). Deux PSAM ont ete utilises, un recepteur chimerique a7-5HT3 permettant l’entree de sodium, et un recepteur mute nAChR permettant l’entree de calcium. Ces lignees ont ete caracterisees en termes de signalisation calcique, proliferation, production d’aldosterone et expression genique. Resultats L’entree de sodium dans les cellules exprimant le PSAM a7-5HT3 traitees 24 h avec un PSEM induit une augmentation secondaire du calcium intracellulaire de facon dose-dependante, sans induire de modification de la proliferation cellulaire. L’entree de calcium induite par l’expression du PSAM nAChR mute apres 24 h de traitement de PSEM n’affecte pas la proliferation cellulaire, mais induit une augmentation de l’expression de genes de la steroidogenese comme StAR, CYP21A2 et HSD3B2. Discussion Ces lignees constituent un excellent outil pour evaluer l’impact de l’alteration ionique et de la signalisation calcique dans la physiopathologie l’HAP.