大鼠“京骨”和“大钟”原络配穴的神经解剖学基础——霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594双标法
2011
目的:用霍乱毒素亚单位B结合荧光素488和594(cholera toxin subunit B conjugated with A1exa Fluor488,594,CTB—Alexa488,594)双标记示踪技术揭示“京骨”和“大钟”穴在大鼠神经系统中的特异性联系,探讨原络配穴的神经解剖学基础。方法:用微量注射器将0.1%CTB-Alexa488和CTB-Alexa594两种示踪剂各5μL分别注入3只雄性SD大鼠后肢“京骨”和“大钟”穴区。72h后将动物灌流固定,取出脑、脊髓和脊神经节,并制成组织切片,然后直接用荧光显微镜系统观察和记录被标记的神经元。结果:在相应的激发光下,CTB-Alexa488和594标记的神经元分别呈绿色和红色,双重标记的神经元呈黄色,均位于示踪剂注入侧的相关神经组织中。在所标记到的神经元中,与“京骨”和“大钟”穴相关联的感觉神经元集中在L4~L5脊神经节,少量分布在L3和L5脊神经节,其中双标的感觉神经元主要出现在L4~L5脊神经节;与两穴相关联的运动神经元以L4~L5节段为中心呈柱状分布在L3~L6节段脊髓前角第Ⅸ层的后外侧部。结论:应用CTB-Alexa4gg和594荧光双标记示踪技术观察到了与原穴“京骨”和络穴“犬钟”相关的感觉和运动神经元在脊神经节和脊髓的分布规律。
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