Níveis séricos e polimorfismos gênicos da Lectina Ligadora de Manose (MBL) e da Serino Protease Associada à MBP (MASP)-2 em uma amostra da população brasileira

A Lectina Ligadora de Manose (MBL) e uma proteina que reconhece carboidratos na superficie microbiana levando a ativacao do sistema complemento. Este processo e mediado por Serino Proteases tal como a MASP-2. O complexo MBL/MASP-2 e responsavel pela formacao da C3 convertase C4bC2b. Os niveis sericos de MBL e a MASP-2 (genes MBL2 e MASP-2, respectivamente) sao geneticamente determinados, e podem ser influenciados pela presenca de polimorfismos em um unico nucleotideo SNPs em genes codificadores destas proteinas. OBJETIVO: Determinar os niveis sericos e polimorfismos genicos da MBL e MASP-2 em uma amostra da populacao brasileira. METODOS: 294 amostras de doadores de sangue [mediana = 36,51 ± 10,56; 18-63 anos; 91/294 (30,95%) sexo feminino, 203/294 (69,05%) sexo masculino] foram genotipadas para os SNPs do exon 1 (MBL2): SNPs localizados nos codons 52 (ArgCys), 54 (GlyAsp) e 57 (GlyGlu) e SNP Asp371Tyr (D371Y, A>C ) do gene da MASP-2 (exon 9). Foi utilizado o ensaio de temperatura de dissociacao para exon 1 (MBL2) e sequenciamento direto dos promoters (H/L, X/Y e P/Q, nas posicoes -550, -221 e +4, respectivamente). A combinacao das variantes do exon 1 MBL2 foram agrupadas e denominadas alelo O e o genotipo selvagem foi denominado A. O exon 9 da MASP-2 foi genotipado atraves da plataforma TaqMan. RESULTADOS: MBL2: 58,5% A/A, 36,39% A/O e 5,1% O/O; promoters: 13% H/H, 39% H/L, 48% L/L; 2% X/X, 26% X/Y, 72% Y/Y; 52% P/P, 37% P/Q, 11% Q/Q; haplotipos encontrados: 15% LXPA, 28% HYPA, 8% LYQO, 12% LYPO, 11% LYPA, 22% LYQA e 4% HYPO. Quanto a producao, 56,12% produziram altos niveis de MBL, 30,61% niveis medios e 13,27% niveis baixos ou insuficientes de MBL. Para MASP-2: 38,78% A/A, 44,56% A/C e 16,67% C/C. CONCLUSAO: A prevalencia (5,1%) SNP O/O do exon 1 (MBL2) esta de acordo com a literatura brasileira, e semelhante a europeia (4%) e japonesa (5%), menor que a africana (10-14%). Niveis sericos de MBL corresponderam aos genotipos determinados. Esta e a... BACKGROUND: Mannose-binding lectin (MBL) is a protein that recognizes carbohydrates on microbial surface leading to complement activation. This process is mediated by MBL-associated serine proteases, such as MASP-2. MBL/MASP-2 complex is responsible for generating the C3 convertase C4bC2b. Both MBL and MASP-2 levels are genetically determined, and can be influenced by the presence of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the genes encoding for these proteins (namely MBL2 and MASP-2). OBJTECTIVE: to determine MBL and MASP-2 serum levels and the frequencies of MBL2 and MASP-2 gene polymorphisms in a Brazilian population sample. METHODS: 294 blood donor samples [median age = 36.51 ± 10.56 years, range 18-63, 91/294 (31%) females and 203/294 (69%) males] were genotyped for MBL2 exon 1 SNPs: single point mutation in codon 52 (ArgCys), 54 (GlyAsp) and 57 (GlyGlu), and MASP-2 polymorphism Asp371Tyr (D371Y, A>C) (exon 9). A melting temperature assay was used to perform the genotyping of MBL2 SNPs. The combination of variants of MBL2 were grouped together as allele O, wild types were indicated as A. Exon 1 promoters were evaluated by direct genotype sequencing- alleles H/L, X/Y and P/Q (positions -550, -221 and +4, respectively). MASP-2 exon 9 genotyping was performed by using TaqMan pre-developed assay. RESULTS: MBL2: 58.5% A/A, 36.39% A/O, 5.1% O/O; promoters: 13% H/H, 39% H/L, 48% L/L; 2% X/X, 26% X/Y, 72% Y/Y; 52% P/P, 37% P/Q, 11% Q/Q; haplotypes: 15% LXPA, 28% HYPA, 8% LYQO, 12% LYPO, 11% LYPA, 22% LYQA and 4% HYPO. MASP-2: 38.78% A/A, 44.56% A/C and 16.67% C/C. CONCLUSION: The prevalence (5.1%) of O/O genotype of MBL2 exon 1 SNPs in our population is in accordance with Brazilian reports, similar to European (4%) and Japanese (5%); lower than Africans (10-14%). There is a correlation between MBL serum levels and genotyping. Moreover, this is the first report of D371Y MASP-2 polymorphism frequency in a Brazilian population. Our data may contribute to...