ITP患者骨髓间质干细胞体外对CD4(+)CD25(+)Treg细胞增殖的影响

2015 
目的:体外研究免疫性血小板减少症(ITP)患者骨髓间质干细胞(MSCs)对CD4(+)CD25(+)Treg细胞的影响。方法:采用Ficoll分离ITP患者及健康对照者骨髓单个核细胞,通过体外培养,扩增出MSCs。通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取ITP患者外周血T淋巴细胞,ITP患者MSCs经丝裂霉素C处理后按不同数量(1×10^3、1×10^4、1×10^5个细胞/孔)(A1、A2、A3组)接种培养板作为基底层细胞;健康对照者MSCs经丝裂霉素C处理后按不同数量(1×10^3、1×10^4、1×10^5个细胞/孔)(B1、B2、B3组)接种培养板作为基底层细胞;然后分别以2×105个细胞/孔接种体外分离纯化的ITP患者T淋巴细胞,设立空白组C组(ITP患者T淋巴细胞单独培养)。培养第3天各自收集T淋巴细胞,用流式细胞术检测各组CD4(+)CD25(+)Treg细胞比例。结果:在血凝素作用下,实验组及对照组各浓度亚组CD4(+)CD25(+)Treg细胞数量均较空白组明显减少(P〈0.05);A2组较B2组CD4(+)CD25(+)Treg细胞数量显著减少(P〈0.05),A3组较A2、B3组CD4(+)CD25(+)Treg细胞数量明显减少(P〈0.05)。结论:ITP患者可能存在MSCs质或量的改变,导致免疫调节功能异常,对CD4(+)CD25(+)Treg细胞增殖抑制作用明显加强,CD4(+)CD25(+)Treg细胞的不足引起外周免疫耐受减弱,MSCs的免疫调节功能异常可能在ITP发病过程中起重要作用。
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