基于分子结构评价的Bacillus subtilis β-1，4-门内切木聚糖酶胰蛋白酶抗性的理性设计术

饲料用酶在饲喂过程中，不可避免地会受到消化道中蛋白酶的破坏而令其使用效率受到影响，因此，饲料酶的蛋白酶抗性是其十分重要的性质之一。基于酶反应原理与计算化学理论对Bacillus subtilis 168 B-1，4-内切木聚糖酶（XynA）的胰蛋白酶抗性进行理性设计，最终得到三个突变体——xynAR121C 、xynAR121C/K98Q和XynAK391。酶学性质分析显示XynAR121CM和XynAR121C/K98Q与野生型（XynA）的最适反应温度均为60℃，XynAK391为40℃；突变体酶与野生型酶的最适pH都是6．0；人工肠液（pH6．8，10mg／ml胰蛋白酶溶液）处理野生型及其突变体后，XynAR121C/K98Q和XynAR121CM的残留酶活力均明显比野生型高，它们的半衰期分别是野生型的2．02倍和1．52倍，XynAK391在胰蛋白酶溶液中的半衰期为90min，比野生型缩短了37min。