Déséquilibre de la réponse lymphocytaire T au cours de l’anémie hémolytique auto-immune

Introduction L’anemie hemolytique auto-immune est une maladie auto-immune (MAI) rare et acquise, dont le mecanisme physiopathologique principal est la production d’auto-anticorps (auto-Ac) par des lymphocytes B (LB) auto-reactifs reconnaissant des antigenes (glycophorine A, rhesus, …) exprimes a la surface des globules rouges (GR) [1] . Le role des lymphocytes T auxiliaires (LT CD4 + ) dans l’initiation et l’entretien de cette reponse auto-immune n’est pas completement elucide, la plupart des donnees de la litterature etant extrapolees de modeles murins ou n’etudiant pas la reponse immunitaire T dans sa globalite en considerant a la fois les versants pro et anti-inflammatoires [2] . Notre etude a donc pour objectif d’etudier de facon concomitante les LT CD4+ effecteurs et les LT regulateurs (LTreg) chez l’homme, au cours de l’AHAI a autoanticorps chauds. L’hypothese est qu’il existe une alteration quantitative et/ou fonctionnelle des LTreg associee a une reponse pro-inflammatoire Th1 et/ou Th17. Patients et methodes Les patients nouvellement diagnostiques AHAI a autoanticorps chauds (n = 24) et les donneurs sains (n = 30), inclus dans le cadre de protocoles de recherche clinique, ont ete apparies selon l’âge et le sexe. Les sous-populations de lymphocyte T circulants ont ete mesurees par cytometrie en flux et leur polarisation quantifiee selon leur production de cytokines apres 4 h de stimulation polyclonale (interferon-γ pour Th1, interleukine-4 pour Th2 et interleukine-17 pour Th17). Parallelement, les LTreg (CD3 + CD4 + CD25 + +Foxp3 + ) ont ete etudies de facon quantitative par cytometrie en flux, en distinguant les Treg actives (CD3 + CD4 + CD45RA-Foxp3high) des Treg quiescents (CD3 + CD4 + CD45RA + Foxp3 + ) et de facon qualitative en evaluant leurs capacites suppressives par un test d’inhibition de la proliferation des lymphocytes T effecteurs autologues. Resultats Les proportions de LT naifs et memoires sont similaires entre patients et temoins mais les frequences des LTh1 et LTh17 tendent a etre plus elevees au cours de l’AHAI. En revanche, la frequence des LTreg circulants diminue chez les patients atteints d’AHAI (3.2 % vs. 4,5 %, p = 0,008). Ce deficit concerne plus particulierement la population LTreg aux capacites hautement suppressives, les LTreg actives (1,2 % vs. 2,1 %, p = 0,001), alors que la frequence des LTreg quiescents et la proportion de LTreg d’origine thymique, exprimant le facteur de transcription Helios, sont similaires chez les patients et les temoins (respectivement 0,50 % vs. 0,51 %, p = 0,65 et 80,4 % vs 82,4 %, p = 0,14). Ainsi, l’augmentation du ratio Th17/Treg (0,32 % vs. 0,13 %, p = 0,01) temoigne du desequilibre de la balance pro- et anti-inflammatoire au cours de l’AHAI. Bien que la proportion des LTreg exprimant CD39 (une ectonucleotidase impliquee dans les mecanismes d’immunosuppression) soit augmentee chez les patients (85,4 %, vs. 69,7 %, p = 0,01), nous observons une alteration fonctionnelle des LTreg au cours de l’AHAI se traduisant in vitro par une diminution de leur capacite a inhiber la proliferation des LT effecteurs (inhibition de 50,3 % vs. 74,4 %, p = 0,03). Conclusion Dans cette etude qui est la premiere a evaluer de facon simultanee les reponses lymphocytaires T CD4 pro et anti-inflammatoires au cours de l’AHAI, nous montrons que les patients atteints d’AHAI presentent un deficit quantitatif et fonctionnel des LTreg circulants conduisant a un desequilibre de la balance pro/anti-inflammatoire en faveur des Th17 a la phase active de la maladie. Dans ce contexte inflammatoire, les LTreg ne sont probablement pas capables d’inhiber les LT CD4+ actives qui participent a la stimulation des LB autoreactifs. Les resultats de nos travaux suggerent que de nouvelles therapeutiques permettant de restaurer la fonction des LTreg pourraient etre envisagees au cours de l’AHAI, afin d’elargir le spectre d’action des traitements actuels qui ne permettent des taux de reponse que de 30 % pour les corticoides et de 75 % pour le rituximab.