Exsudatos de plantas: um estudo de revisão e efeito anti-helmíntico sobre o nematoide Haemonchus contortus

A infeccao por nematoides gastrintestinais e considerada o principal problema sanitario da criacao de pequenos ruminantes, sendo Haemonchus contortus o endoparasito de maior prevalencia e patogenicidade. O uso indiscriminado e continuado de produtos anti-helminticos tem selecionado populacoes resistentes dos parasitos a esses produtos. Os produtos de origem natural em especial de plantas tem sido considerados como uma alternativa potencial no controle de parasitos gastrintestinais. Entretanto, estudos sobre identificacao de proteinas obtidas de exsudatos de sementes de plantas sao raros. Assim, o presente trabalho foi dividido em dois capitulos com intuito de ampliar estudos prospectivos sobre a busca de novos compostos biotivos derivados de exsudatos vegetais. No capitulo 1, fornecemos atraves de uma revisao, uma visao geral sobre os exsudatos liberados pelas propriedades biologicas plantas, suas e a presenca de varios compostos, obtidos e analisados por diferentes procedimentos. No capitulo 2, objetivou-se identificar proteinas dos exsudatos proteicos de sementes de Mimosa caesalpiniaefolia, Leucaena leucocephala, Acacia mangium e Stylosanthes capitata, bem como avaliar sua acao anti-helmintica sobre o nematoide gastrointestinal H. contortus. Apos sanitizacao, as sementes foram embebidas em tampao acetato de sodio (0,1M, pH 5,0) por 24h a 10 oC. Proteinas presentes nos exsudatos foram obtidas por fracionamento com sulfato de amonio (0-90%). Apos precipitacao, os exsudados foram incubados durante 4h a 10 °C e as proteinas recuperadas por centrifugacao (12.000 x g, 4 °C 30 min). O sobrenadante foi descartado e o sedimento foi ressuspendido em tampao acetato de sodio 0,1 M, pH 5,0 e dialisados contra agua (cut off: 2 kDa), liofilizados e armazenados (-20 oC). O teor de proteinas nos exsudatos foi avaliado, assim como o efeito inibitorio na eclosao de ovos (EHA) e inibicao do desembainhamento larvar (LEIA) de H. contortus. Obteve-se 0,49; 0,06; 0,10; e 0,11 microgramas de proteinas exsudadas por grama de sementes, respectivamente, em M. caesalpiniaefolia; L. leucocephala; A. mangium e S. capitata. Embora os exsudatos nao tenham inibido a eclosao de ovos, inibiram o desembainhamento de larvas de H. contortus com concentracoes efetivas, EC50, variando entre 0,26 e 0,61 mg/mL. Os exsudatos de L. leucocephala e S. capitata foram mais efetivos sobre a inibicao do desembainhamento de larvas (EC50 0,26 e 0,40 mg/mL, respectivamente). De acordo com os dados obtidos por espectrometria de massas dos exsudatos, detectou-se a presenca diversas proteinas, dentre elas: protease, inibidor de protease, quitinase e lectina. Assim, atraves deste estudo sobre acao exsudatos de sementes sobre H. contortus, concluimos que estes apresentam diversas proteinas relacionadas com a defesa do vegetal e que podem estar relacionadas com a acao inibitoria do desembainhamento larvar do nematoide, caracterizando-se como uma potencial alternativa para o controle deste parasito.