Expression fonctionnelle et clonage d'un transporteur hepatocytaire basolateral sodium-independant des anions organiques

Les hepatocytes transportent de nombreux anions organiques endogenes (acides biliaires, bilirubine) et exogenes (bsp) du sang vers la bile. Pour etablir et maintenir ce transport vectoriel des anions organiques, des systemes de transport distincts sont situes aux poles membranaires basolateral et canaliculaire de l'hepatocyte. Nous rapportons l'identification, le clonage et la caracterisation d'un adnc de foie de rat codant pour un transporteur membranaire basolateral sodium-independant des anions organiques (oatp). L'adnc codant pour oatp a ete identifie a l'aide de la methode de clonage par expression fonctionnelle dans les ovocytes de xenope. Le transporteur clone transporte de maniere sodium-independante et saturable la bsp, le cholate et le taurocholate. L'adnc a une taille totale de 2759 nucleotides (sans la queue de poly(a)), avec un cadre ouvert de lecture de 2010 nucleotides, une region 5'non codante de 86 nucleotides et une region 3' non codante de 662 nucleotides. La region codante code pour une proteine de 670 acides amines avec une masse moleculaire calculee de 74 kda. L'analyse assistee par ordinateur de l'oatp predit 3 a 4 sites de glycosylation de 10 domaines transmembranaires potentiels. Le modele predictif ainsi etabli indique que les sites de glycosylation sont localises sur la face extracellulaire alors que les extremites nh#2 et cooh sont localisees a l'interieur de la cellule. La comparaison de la sequence de l'oatp n'a pas retrouve d'homologie significative avec les proteines de transport membranaire deja clonees. Ces donnees suggerent que l'oatp represente une nouvelle classe de proteines de transport des anions organiques. Des arnm de l'oatp ont ete detectes dans le foie de rat et de souris et dans differents organes chez le rat (rein, colon proximal, cerveau, poumon, muscle squelettique), ce qui suggere que la fonction de l'oatp n'est pas restreinte au foie de rat, mais est aussi presente dans d'autres tissus et d'autres especes