Estudio de la señal de localización y comportamiento dinámico del factor de transcripción y splicing TCERG1

El nucleo de la celula eucariota es una estructura altamente compartimentalizada, donde el material genetico se dispone a modo de territorios cromosomicos que dejan lugar a un gran numero de subestructuras u organulos nucleares. A pesar del aparente estado estatico de los organulos nucleares, sus proteinas estan sometidas a un elevado dinamismo, probablemente debido a la falta de membranas que delimitan su estructura, caracteristica que los diferencia de los organulos citoplasmaticos. En este movimiento proteico generalizado dentro del nucleo las senales de localizacion juegan un importante papel, pues a ellas se debe la correcta distribucion de los componentes de cada uno de los diferentes organulos. En esta tesis hemos identificado y caracterizado la senal responsable de la localizacion del factor de transcripcion y splicing TCERG1 en la periferia de los speckles nucleares, organulos enriquecidos principalmente en factores de splicing como por ejemplo las proteinas SR o las particulas snRNP. Dentro de TCERG1, los dominios FF4/FF5 (aminoacidos 878 a 1021) son la senal necesaria y suficiente para la correcta localizacion de la proteina. Ademas estos dominios constituyen la senal suficiente para la localizacion de otras proteinas en los speckles nucleares. De esta manera, los dominios FF4/FF5 de TCERG1 representan una nueva senal de localizacion general hacia los speckles nucleares no identificada hasta el desarrollo de esta tesis. Nuestros estudios encaminados a conocer las bases moleculares en las que se sustenta el papel de los dominios FF4/FF5 como senal de localizacion hacia los speckles nucleares han identificado a la proteina Nopp140 como la posible responsable de esta localizacion. De acuerdo con el elevado dinamismo ya citado, TCERG1 presenta una alta movilidad en el nucleo, que se muestra practicamente identica en los diferentes compartimentos estudiados (speckles nucleares y nucleoplasma). Este movimiento se muestra ademas independiente del estado transcripcional de la celula. Los estudios de FRAP (fluorescence recovery after photobleaching) realizados para determinar todos estos parametros han sido empleados tambien para describir las propiedades dinamicas de TCERG1 en relacion a las maquinarias de transcripcion y splicing, aportando datos que apoyan el papel ya propuesto para TCERG1 en el acoplamiento entre ambas maquinarias.