乳酸乳球菌Q-9胞外多糖对鲤先天免疫应答、抗氧化活性和抗病性能的影响

为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响，实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养，检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组，对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline, PBS)，处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)，1次/天，连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后，阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌，阴性组用无菌PBS处理，感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量，及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性；肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示，EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性，并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示，与阴性对照组相比，EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量，LZM和AKP活性，以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后，NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否，EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。研究表明，EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力，可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖。