ATRP法制备聚(甲基丙烯酸氨乙酯- co -甲基丙烯酸 N,N -二乙基氨乙基酯)基因载体
2014
为得到低毒、高效的聚阳离子基因载体,以甲基丙烯酸氨乙酯(AMA)和甲基丙烯酸N,N-二乙基氨乙基酯(DEAEMA)为单体,以2-溴代异丁酸乙酯(EBIB)为引发剂,通过原子转移自由基聚合(ATRP)制备了两种聚(甲基丙烯酸氨乙酯-co-甲基丙烯酸N,N-二乙基氨乙基酯)阳离子无规共聚物(P(AMA-co-DEAEMA), 简称P). 琼脂糖凝胶电泳实验结果表明聚合物P作为阳离子载体可以有效地络合DNA,通过粒径仪测定的复合物粒子的尺寸在400~600 nm之间. 扫描电镜观察的P/DNA复合物形貌是分散均匀的球形颗粒. 以25 kDa PEI为阳性参照,利用MTT比色法考察了聚合物P对HEK293T细胞的毒性. 结果表明,聚合物P的细胞毒性低于25 kDa PEI的细胞毒性. 以25 kDa PEI和裸质粒DNA作为参照,我们进一步考察了聚合物P与DNA形成的复合物在HEK293T细胞中的转染效率. 结果表明P/DNA复合物在HEK293T细胞中的转染效率远远高于裸质粒DNA的转染效率,并且接近于25 kDa PEI/DNA复合物的转染效率.
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