ВЛИЯНИЕ ЦЕНТРИНА 2 НА ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ ФАКТОРОВ ЭКСЦИЗИОННОЙ РЕПАРАЦИИ НУКЛЕОТИДОВ С ПОВРЕЖДЕННОЙ ДНК

Исследовано влияние центрина 2 (Cen2) на взаимодействие факторов эксцизионной репарации нуклеотидов - XPC HR23b, RPA и XPA - с 48 мерными ДНК дуплексами, содержащими производное dUMP (5 {3[6 (карбоксиамидо флуоресцеинил)амидокапромоил]аллил} 2' дезоксиуридин 5' монофосфат). Остаток флуоресцеина, присоединенный к основанию нуклеотида, имитирует объемное повреждение ДНК. Показано, что Cen2 стимулирует связывание и повышает выход белок нуклеиновых аддуктов ДНК с XPC HR23b - белком, узнающим объемные повреждения в структуре ДНК. Эффект стимуляции комплексообразования наиболее выражен в присутствии Mg2+ и имеет колоколообразную зависимость от концентрации Cen2. В присутствии Cen2 изменяется стехиометрия комплексов RPA ДНК и уменьшается выход ковалентных сшивок RPA с ДНК. Обнаружено влияние Cen2 на совместное комплексообразование RPA и XPA с ДНК, выраженное в появлении дополнительных ДНК белковых комплексов, возможно, включающих центрин 2. Получены данные о существовании прямых контактов Cen2 с ДНК. Результаты настоящих исследований в совокупности с литературными данными позволяют предположить, что Cen2 является регуляторным элементом системы ЭРН.