miR-126敲减增强小鼠CD4~＋T细胞体内活性并促进其向Th1细胞分化

目的观察miR-126基因敲减（KD）小鼠体内CD4＋T细胞活性的变化并探讨其意义。方法利用磁珠活化细胞分选技术（MACS）分选miR-126KD小鼠脾脏CD4＋CD62L＋T细胞,实时定量PCR检测细胞内miR-126成熟体的表达水平;荧光激活细胞分选术（FACS）检测CD4＋T细胞表面活化标志CD69、CD62L和CD44分子以及Ki-67的表达变化;膜联素Ⅴ/碘化丙啶（annexinⅤ/PI）双染色法结合流式细胞术检测CD4＋T细胞的凋亡情况;实时定量PCR检测CD4＋T细胞功能相关细胞因子白细胞介素4（IL-4）、IL-10、IL-12、转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）的mRNA水平变化。结果与野生型（WT）小鼠组相比,miR-126KD小鼠组CD4＋T细胞内miR-126成熟体的表达显著下调;FACS结果显示miR-126KD小鼠CD4＋T细胞表达CD62L的比例明显减少,而表达CD69、CD44以及Ki-67细胞的比例显著增加,CD4＋T细胞的体内凋亡比例显著减少;CD4＋T细胞中IL-4、IL-10的mRNA水平明显降低,而IL-12、TGF-β、TNF-α以及IFN-γ的mRNA水平显著增加。结论 miR-126KD小鼠体内CD4＋T细胞的活性显著增强并促进其向Th1细胞分化。