Études structure-fonction de mutants d’ABCA3 dans le cadre de pathologie héréditaire du surfactant pulmonaire

Introduction La proteine ABCA3 est un acteur cle de la biosynthese du surfactant au sein des corps lamellaires des pneumocytes de type 2, notamment grâce a son role de transporteur de phospholipides. Des mutations d’ ABCA3  sont a l’origine de detresses respiratoires neonatales ou de pneumopathies interstitielles diffuses, transmises selon un mode autosomique recessif. La classification de ces mutations en fonction de leurs consequences sur la proteine est encore approximative. Une classification plus fine permettra une therapie personnalisee en fonction du genotype, c’est pourquoi nous mettons en place dans notre laboratoire ces analyses en vue de les realiser en routine pour les nouveaux mutants identifies chez les patients atteints de pathologies du surfactant. Methodes La maturation et le transport de la proteine ABCA3  mutee sont observes par western blot et microscopie confocale a partir de cellules A549 transfectees de facon transitoire. Des analyses fonctionnelles sont mises en place : activite ATPasique par dosage colorimetrique des phosphates liberes, transport de drogues et profil lipidique de la cellule. Resultats Differents mutants ont ete analyses au sein du laboratoire, parmi lesquels des mutants deja decrits dans la litterature comme L101P , E292V et R288K , afin de servir de controles et/ou d’affiner les resultats deja publies. De plus, nous appliquons ces techniques a un nouveau mutant Q1045H qui a ete identifie dans le laboratoire de genetique de l’hopital Henri Mondor a l’etat homozygote dans deux familles avec phenotype variable. Conclusion Au cours de la mise en place d’outils d’etude d’ ABCA3  dans notre laboratoire, les analyses structurales du mutant Q1045H , montrant une maturation et une localisation similaires a la proteine sauvage, laissent supposer qu’il s’agit d’un mutant de fonction. Son defaut fonctionnel partiel est a l’origine de la maladie d’expressivite variable dans les familles.