Expresión atípica en la detección y cuantificación del virus de Epstein-Barr utilizando PCR en tiempo real

La carga viral del virus de Epstein-Barr (VEB) no solamente sirve para detectar una infeccion activa, sino tambien como marcador tumoral de ciertas formas malignas. En los pacientes inmunocomprometidos esta relacionado con el sindrome linfoproliferativo postrasplante (SLPT) y la incidencia se encuentra en el orden de 1 a 20%. Se recomienda la determinacion de la carga viral del VEB en sangre total y plasma para dar seguimiento a los pacientes en riesgo de padecer el SLPT; para esto, se utiliza como herramienta la reaccion en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR-TR). El objetivo de este trabajo es describir los hallazgos de las variaciones identificadas en el genoma del VEB al realizar la deteccion y cuantificacion en muestras de pacientes pediatricos, utilizando la tecnologia de PCR-TR. Metodos. Se analizaron retrospectivamente los resultados de 352 pacientes pediatricos a los que se les habia realizado la deteccion y cuantificacion del VEB en sangre periferica y plasma por medio de PCR-TR. Se amplifico un fragmento de 166 pb del genoma, utilizando un diseno de la compania TIB MOLBIOL y el equipo LightCycler®, con una temperatura especifica de desnaturalizacion (Tm) de 68 °C. Resultados. De los 352 pacientes estudiados, se detecto la presencia del VEB en 132 (37.5%) y se cuantifico la carga viral. En 5 de los pacientes positivos (3.8%), se identifico un cambio de la Tm. Por medio de electroforesis en gel de agarosa, se comprobo que el amplificado obtenido corresponde al fragmento de 166 pb. Conclusiones. Consideramos que puede existir una disminucion en la concentracion de guanina-citosina (G-C) en la secuencia blanco, ya que la Tm sufrio una disminucion en todos los casos reportados. Sin embargo, se requiere la secuenciacion de los amplificados para determinar con precision la causa de disminucion en la Tm