重组表达人载脂蛋白（a）羧基末端kringle结构域抑制新生血管

目的利用毕赤酵母重组表达人载脂蛋白（a）[Apo（a）]羧基末端kringle结构域，明确其抑制新生血管和肿瘤细胞增殖的能力。方法分别构建重组表达Apo（a）羧基末端kringle V结构域（RHAKA）与kringle 1V10型-krin--eV结构域（RHAKB）的pPICZotA质粒；转染毕赤酵母x-33分泌表达RHAKA与RHAKB，RHAKs利用His·Tag亲和层析纯化，以及反相高效液相色谱与氨基酸残基测序鉴定；明确RHAKs的糖基化及二硫键形成情况后，利用细胞增殖实验与鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验检测RHAKs对新生血管和肿瘤细胞增殖的影响。结果毕赤酵母可以大量表达RHAKs，并对RHAKs进行翻译后修饰；RHAKA与RHAKB可以抑制血管内皮细胞的增殖和CAM的新生血管，但对肿瘤细胞增殖无直接的抑制作用。结论利用毕赤酵母高效重组表达人Apo（a）羧基末端kringle结构域可以显著抑制新生血管。