Functional assays for screening antibody activity in droplet-based microfluidics

Les methodes de criblage haut-debit sur des cellules necessitent de petits volumes afin de reduire les couts et permettre une manipulation rapide des echantillons. En effet, une miniaturisation supplementaire des technologies classiques de criblage haut-debit en plaques devient problematique a cause de l’evaporation et des forces capillaires. Pour surmonter ces limitations, on a developpe des systemes bases sur la microfluidique en gouttes ou des cellules sont cultivees dans des microcompartiments aqueux independants entoures d’huile perfluoree inerte. Un tel systeme permet d’effectuer des analyses automatisees a l’echelle individuelle de chaque compartiment suite a un certain temps d’incubation comme le requiert les tests cellulaires a haut-debit. Nous nous sommes focalises egalement sur le developpement de tests fonctionnels pour le criblage d’anticorps comme par exemple les anticorps neutralisants le VIH (Virus de l’Immunodeficience Humaine) ou inhibant l’ECA (Enzyme de Conversion de l’Angiotensine). Les approches haut-debit pour la selection d’anticorps utilisent le « phage display » ou des hybridomes. « Phage display » est une methode efficace mais permet de selectionner les anticorps pour leur activite de liaison et non pas de neutralisation. Les hybridomes permettent d’effectuer une selection en fonction de l’activite neutralisante des anticorps, mais dans cette approche on est limite par le nombre de clones pouvant etre selectionnes. Le but de ce projet etait d’etablir un nouveau test permettant de selectionner, au niveau de cellules uniques, des cellules secretrices d’anticorps (hybridomes). Ce systeme pourra etre utilise egalement pour le criblage de cellules B. Une fois etabli, ce systeme pourrait etre utilise pour le criblage/selection de beaucoup d’autres anticorps therapeutiques.