基于HPLC—DAD—SPE—CryoNMR—MS技术的代谢物快速定性和结构确定

快速定性并有效地确定代谢物结构是代谢组学、植物化学和天然药物发现等研究的重要内容．本文以迷迭香的两种溶剂提取物（氯仿／甲醇=3／1和50％含水甲醇）作为模型样品，通过分析其中的－些化学成分，展现了HPLC—DAD-SPE—CryoNMR—MS无缝联仪技术在确定代谢物结构方面的应用潜力．基于高效液相色谱、紫外吸收、核磁共振波谱及质谱数据，具有代表性的6个迷迭香代谢物的结构得到了确定，它们分别为1个酚类二萜（鼠尾草酚）、2个酚酸（迷迭香酸和咖啡酸）、2个黄酮（6-甲氧基木樨草素－7－葡萄糖苷和高车前甙）和1个香豆酸（顺－4－香豆酸葡萄糖苷）．该技术使分析型HPLC柱所分离的组分可以获得高质量同核及异核二维核磁共振波谱，从而能够更加便捷地确定微量成分的结构．这些研究结果不仅提供了上述6种代谢物详细的谱学数据，而且证实HPLC—DAD-SPE—CryoNMR—MS技术是天然产物以及其他复杂体系结构分析的重要工具，即使同一色谱峰中含有浓度相差一个数量级的多个代谢物时，该方法依然有效．