Determinación del momento de la ovulación como estrategia para incrementar la fertilidad utilizando semen criopreservado en la especie porcina

Uno de los principales factores que afectan a las tasas de fertilidad es el intervalo entre la inseminacion artificial y la ovulacion, principalmente cuando utilizamos semen congelado debido a su reducida vida fertil. El principal objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de la incorporacion de antioxidantes en los medios de congelacion sobre la calidad del semen de verraco criopreservado, a la vez que se evaluaron los patrones de cristalizacion del moco vestibular, los cambios en la resistencia electrica genital y en la temperatura corporal, para utilizarlos como pronosticadores del momento de la ovulacion. En la primera experiencia se evaluaron los diferentes patrones de cristalizacion encontrados en el moco vestibular y se determino la posible correlacion con los cambios en la resistencia electrica vestibular. El valor maximo de resistencia vestibular se alcanzo entre las 12 y 24 horas tras el momento de ovulacion en el 83 % de las cerdas. Por otra parte, los patrones de cristalizacion se clasificaron en 3 grupos en funcion del grado de cristalizacion. El maximo nivel de cristalizacion se determino entre las 48 y 36 h antes del momento de ovulacion, cuando la resistencia vestibular se incrementaba gradualmente. En el momento optimo de inseminacion la resistencia electrica aumento significativamente, mientras que la cristalizacion del moco vestibular fue minima. En la segunda experiencia se analizaron los cambios en la temperatura de la piel de la zona vulvar y auricular y las modificaciones de la resistencia electrica a una distancia de 4, 8, y 12 cm de la vulva durante el estro. Se determinaron diferencias en los valores de temperatura medidos en la zona vulvar y auricular durante el periodo peri-ovulatorio. La temperatura medida en ambos lugares disminuyo significativamente (P <0,05) 12 h antes del momento de ovulacion. Los valores de resistencia electrica determinados a 4 cm de la vulva mostraron cambios significativos durante el estro, los cuales fueron diferentes a los medidos a los 8 y 12 cm de la vulva. Se determino una correlacion negativa entre la temperatura del area vulvar y la resistencia vaginal medida a los 8 y 12 cm de la vulva. El objetivo de la tercera experiencia fue investigar el efecto protector de dos antioxidantes procedentes de extractos de plantas, la melisa y la yerba mate sobre la calidad del semen epididimario de verraco tras la descongelacion. No se determinaron diferencias entre los grupos experimentales en relacion a la motilidad, viabilidad e integridad acrosomal, aunque la incorporacion de melisa a una concentracion de 10 g/l mejoro los parametros de VCL, STR y ALH tras la descongelacion (P <0,05). La suplementacion de melisa y yerba mate redujo los niveles de peroxidacion lipidica. Sin embargo, unicamente la yerba mate protegio al ADN del dano oxidativo a los 120 min tras la descongelacion (P <0,05). Las muestras espermaticas congeladas con 10 g/l de yerba mate mostraron los niveles mas bajos de MDA y de espermatozoides con dano oxidativo en el ADN. En la cuarta experiencia se determino en el efecto antioxidante del acido rosmarinico (RA) en la calidad y capacidad de fecundacion in vitro del semen de verraco criopreservado. La motilidad total y progresiva fue significativamente mayor en las muestras congeladas con RA que en el control a los 0 y 120 min tras la descongelacion (P <0,05). El porcentaje de espermatozoides con la membrana plasmatica y acrosomal integra fue superior en la muestras suplementadas con 105 ?M (P <0,05). Los niveles de MDA de las muestras control fueron significativamente mayores que en las muestras congeladas con 105 ?M RA (P <0,05). Tras la descongelacion los porcentajes de ADN oxidado fueron muy bajos y similares entre diluyentes. Sin embargo, a los 120 y 240 min despues de la descongelacion las muestras espermaticas suplementadas con 105 ?M RA redujeron el dano oxidativo en el ADN en comparacion con los otros diluyentes. Finalmente los porcentajes de penetracion fueron mayores en los espermatozoides congelados con 105 ?M RA (P <0,05), aunque las tasas de monospermia no fueron significativamente diferentes. En la quinta experiencia, evaluamos la utilidad de los cambios de temperatura durante el periodo peri-ovulatorio como pronosticadores del momento de la ovulacion, a la vez que se determinaron las tastas de fertilidad obtenidas tras la inseminacion artificial con semen congelado suplementado con RA. La motilidad total y progresiva, la viabilidad y la integridad acrosomal fue significativamente mayor en las muestras con RA que en las muestras control (P <0,05). En todas las cerdas inseminadas se recogieron embriones. Las cerdas inseminadas con RA mostraron un leve incremento en el numero de embriones obtenidos comparado con las cerdas inseminadas con las muestras control. Sin embargo, las tasas de fertilidad no mostraron diferencias en ambos grupos experimentales.