Le complexe ternaire procarboxypeptidase A-S6 pancréatique de boeuf : est-il un complexe multi-enzymatique ?

Le pancreas exocrine des bovides secrete le complexe ternaire procarboxypeptidase as6. Une procarboxypeptidase de type a (procpa) constitue l'element central du complexe et possede deux sites de fixation distincts pour la sous-unite ii (un chymotrypsinogene de type c), et la sous-unite iii (une protease e inactive). L'objet de cette these etait de preciser l'interet fonctionnel de ce complexe. Nous avons montre que le pancreas des camelides secrete un complexe ternaire similaire a celui des bovides. Il s'agit donc d'une caracteristique propre aux ruminants puisque chez le cheval, herbivore non ruminant, la procpa est secretee sous forme monomerique. Tous les parametres thermodynamiques de l'association entre les sous-unites ont ete determines par microcalorimetrie. L'incidence de l'association sur l'efficacite catalytique des enzymes a ete examinee. L'activation de la sous-unite ii ne s'accompagne pas de la dissociation du complexe ternaire. Son efficacite catalytique croit lorsqu'elle est associee a la procpa. L'activation de la procpa est complexe. Apres coupure par la trypsine de la liaison 94-95, son peptide d'activation ne se separa pas de l'enzyme et exerce sur elle un effet inhibiteur. L'activation de la procpa necessite une proteolyse extensive du peptide. Or, nos resultats demontrent que la presence du peptide d'activation est indispensable a la cohesion du complexe. L'activation de la procpa s'accompagne donc de la dissociation du complexe. La procpa monomerique, instable au ph acide regnant dans le duodenum des ruminants, est stabilisee dans le complexe ternaire. L'ensemble de ces resultats nous ont permis de proposer un mode d'action du complexe in vivo. Ce complexe plurienzymatique repondrait a deux imperatifs physiologiques: vehiculer la procpa sous forme native jusqu'a son lieu d'action (role de protection) et augmenter l'efficacite catalytique de la sous-unite ii (role de regulation)