Кальций-активируемые K+-каналы большой проводимости в мезенхимальных стромальных клетках человека

Механизмы электрогенеза в мезенхимальных стромальных клетках (МСК) изучены недостаточно, в частности, мало известно о спектре и свойствах ионных каналов, активных в покое и активирующихся при стимуляции МСК. Некоторые агонисты гептаспиральных рецепторов способны инициировать Са2+ сигнализацию в цитоплазме МСК. Поэтому несомненный интерес представляет роль Са2+-активируемых ионных каналов в генерации физиологических ответов МСК на Са2+-мобилизующие агонисты. Целью данной работы было исследование Ca2+-активируемых токов в МСК человека методом patch clamp и идентификация соответствующих ионных каналов с использованием ингибиторного анализа. Оценивались электрофизиологические характеристики клеток в покое и при аппликации Са2+-ионофора, который вызывал существенное увеличение концентрации внутриклеточного Са2+. Оказалось, что в покоящихся клетках интегральная ионная проницаемость плазмалеммы характеризовалась почти линейной вольт-амперной (I–V) характеристикой c наклоном 0.3–3 нСм и потенциалом реверсии –30... –10 мВ. В присутствии иономицина наблюдалось существенное увеличение интегральной проводимости, и I–V кривая становилась нелинейной с выраженным выходным выпрямлением в области положительных потенциалов. Потенциал реверсии интегральных токов смещался в сторону потенциала Нернста при физиологическом градиенте ионов К+. Эффекты иономицина ингибировались ибериотоксином – специфическим блокатором Са2+-активируемых К+-каналов BK-типа. Природный липидный медиатор – арахидоновая кислота – потенцировал Са2+-активируемые К+-токи в МСК. Пуринергический агонист АТР, который мобилизовал Са2+ в цитоплазме МСК, также стимулировал выходящие К+-токи, блокируемые ибериотоксином. Полученные данные свидетельствуют о том, что ВК-каналы функциональны практически в каждой МСК и могут быть вовлечены в генерацию клеточных ответов на агонисты, мобилизующие внутриклеточный Са2+.