Etude in vitro de la réabsorption tubulaire proximale de l'uranium : conséquences fonctionnelles

L'uranium etant in fine accumule au sein des lysosomes des cellules tubulaires proximales, il est probable que l'endocytose soit le processus de transport de cet element. Nous avons cherche a determiner, lors de cette etude, quelle pouvait etre son implication vis-a-vis de l'absorption de l'actinide et de la toxicite induite. La caracterisation des parametres de l'absorption de l'uranium par les cellules LLC-PK1, d'origine tubulaire proximale, montre que le systeme principal de transport est saturable (Vm = 16. 95 ± 0. 92 PMOL/mg prot. /h), l'affinite apparente etant de 1. 105 ± 0. 175 umol/l. De maniere similaire au processus endocytique clathrine-dependant, ce systeme de transport est un processus actif, dependant de l'integrite du cytosquelette et de l'etat d'activation de PKC. L'absorption de l'uranium est ainsi respectivement reduite 85. 9, 35. 9, 56. 8 et 46. 6 % lorsque les cellules sont incubees a 4°C pendant 1 heure ou pre-traitees avec 1 umol/l de colchicine, 0. 5 umol/l de cytochalasine D et 10 nmol/l de PMA. Il est egalement inhibe de 45. 1 % par 10 umol/l de chlorpromazine et de 83. 9 % lorsque les etudes sont effectuees en milieu hypertonique. Cette inhibition s'accompagne cependant d'une potentialisation de la cytotoxicite de l'actinide. Nos travaux montrent que cet effet resulte de stimulation du transport sodium-dependant du phosphate (NaPi), et reciproquement, que son inhibition supprime la toxicite de l'uranium. Ces observations sont confirmees lorsque les etudes sont conduites sur le modele cellulaire MDCK, d'origine tubulaire distale, transfecte avec l'ADNc codant pour le co-transporteur rNaPi-2. La sur-expression du co-transporteur stimule l'activite de transport du phosphate d'un facteur 4 et la cytotoxicite de l'uranium d'un facteur 3. Nous suggerons donc que l'endocytose clathrine-dependante est le mecanisme cellulaire principal de l'absorption de l'uranium, et que les co-transporteurs NaPi transportent la fraction cytotoxique de l'actinide.