日本血吸虫组织蛋白酶L2（SjCL2）基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建

目的扩增SjCL2基因,构建巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础.方法运用RT-PCR技术,从日本血吸虫(中国大陆株)成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB质粒;经KpnⅠ、XbaⅠ双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序分析SjCL2基因并确定其读码框的正确插入.结果利用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约1Kb大小的SjCL2基因,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB中.结论成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB-SjCL2质粒.