Detection of rubella virus RNA in serum samples by RT-PCR assay

Em geral, a reacao de polimerizacao em cadeia precedida de retrotranscricao (RT-PCR) tem demonstrado ser um metodo rapido e sensivel para detectar o RNA do virus rubeola em uma variedade de materiais clinicos. A reacao de RT-PCR foi utilizada para detectar o virus no soro e confirmar o teste sorologico em individuos infectados com virus da rubeola. Para este estudo, uma fita simples de RNA viral, extraida do soro, foi usada como fita-molde para para a transcricao reversa, seguida da amplificacao com dois diferentes pares de olinucleotideos iniciadores e de uma segunda amplificacao com outros pares de oligonucleotideos. O metodo do RT-PCR foi utilizado para se examinar amostras de soro de nove pacientes com sorologia confirmada para o virus da rubeola. Quatro soros testados por RT-PCR tiveram como resultado infeccao pelo virus da rubeola. Os soros foram primeiramente analisados utilizando-se de 500µl para a extracao de RNA. O virus da rubeola foi tambem analisados utilizando-se 500µl para a extracao de RNA. O virus da rubeola foi tambem analisado utilizando-se volumes menores de soro, e somente uma amostra foi amplificada a partir da extracao do RNA viral de 300µl. Neste estudo, a estrategia de se utilizar soro no desenvolvimento do teste RT-PCR sugere ser uma alternativa a mais para o diagnostico da infeccao pelo virus da rubeola