红笛鲷( Lutjanus sanguineus ) CD4 和 CD4-2 基因克隆与诱导表达

应用RT-PCR和RACE-PCR技术克隆了红笛鲷（Lutjanus sanguineus） CD4 和 CD4-2 基因，并分析了它们在健康鱼不同组织的表达分布及免疫刺激物诱导后的表达变化。 CD4 基因cDNA序列全长2216bp，包含180bp的5' UTR（untranslated regions）、605bp的3' UTR和1431bp的开放阅读框（open reading frame，ORF），编码476个氨基酸；红笛鲷 CD4-2 基因cDNA序列全长为1520bp，包含62bp的5' UTR、525bp的3' UTR和933bp的ORF，编码310个氨基酸。CD4分子由信号肽、4个免疫球蛋白样结构域（D1-D4）构成的胞外区、跨膜区和胞浆区组成，CD4-2分子由信号肽、2个免疫球蛋白样结构域（D1-D2）构成的胞外区、跨膜区和胞浆区组成。荧光定量PCR（Real Time Quantitative PCR，qPCR）分析显示红笛鲷 CD4 和 CD4-2 基因在健康鱼的胸腺中表达量最高，其次是中肾、鳃、皮肤、脾、头肾和肠。红笛鲷头肾淋巴细胞体外经脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）和刀豆蛋白A（Concanavalin A，ConA）刺激12h后，CD4和CD4-2表达量显著上调（ P P < 0.05）。研究结果为进一步研究鱼类CD4和CD4-2在抗菌免疫反应中的作用提供了基础资料。