组织因子/活性凝血7因子体外激活大肠癌LOVO细胞基质金属蛋白酶-7基因启动子

2008 
目的观察组织因子(TF)/活性凝血7因子(FVIIa)复合物对大肠癌LOVO细胞系基质金属蛋白酶-7(MMP-7)基因启动子的激活。方法靶向组织因子基因的小干扰RNA(siRNA)构建及稳定转染获得TFRNAi LOVO细胞系;Western blot检测组织因子的干扰效率;NNP-7基因上游5′非翻译区DNA调节序列及缺失体克隆到pGL3-basic荧光素酶报告基因载体;双报告基因检测FVIIa因子存在时,MMfr7.luc1592、MMP7.luc978、MMP7.luc615瞬时转染LOVO细胞或TFRAi LOVO细胞启动子活性。结果Western blot灰度半定量显示TFRNAi LOVO细胞中组织因子蛋白表达水平较LOVO细胞下降41.7%;双报告基因检测FVIIa因子存在时MMP7.luc1592具有启动子活性并依赖组织因子,活性区域位于MMP-7基因转录起始点上游-978bp及-615bp之间。结论TF/FVIIa能直接激活大肠癌LOVO细胞系MMP-7基因启动子。
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