Formation et stabilité des photohydrates pyrimidiniques dans l'ADN

La photolyse ultraviolette (254 nm) de solutions aqueuses des copolymeres poly(dC-dC) et poly(dA-dU) engendre lit formation d’hydrates pyrimidiniques. Il a ete montre recemment que ce photoproduits etaient substrats de glycosylases bacteriennes et de mammiferes (Biochemistry. 28 : 6164, 1989). Une de ces enzymes de reparation, l’endonuclease III, a cle utilisee dans ce travail pour etudier la formation et la stabilite de cette importante classe de photoproduits pyrimidiniques dans les copolymeres poly(dC-dC) et poly(dA-dU). L’irradiation du poly(dG-dC) a une dose de 100 kJ/m 2 (254 nm) de lumiere de l’ultraviolet lointain entraine une conversion du residu cytosyle en 2,2% d’hydrate de cytosine (hydroxy-6 dihydro-5,6 cytosine) et 0,09% d’hydrate d’uracile (hydroxy-6 dihydro-5,6 uracile). La stabilite des photohydrates pyrimidiniques a ete etudiee en incubant les copolymeres pendant une periode de 24 heures a differentes temperatures apres irradiation. L’hydrate de cytosine est stable lorsque la temperature est maintenue a 4°C. La stabilite de l’hydrate decroit avec l’augmentation de la temperature, la demi-vie etant de 75, 25 et 6 heures a des temperatures de 25°C, 37°C et 55°C respectivement. L’hydrate d’uracile dans le copolymere poly(dA-dU) irradie est stable a 4°C et a 25°C, et decroit avec une demi-vie de 6 heures a 37°C et de moins d’une demi-heure a 55°C. L’hydrate d’uracile et l’uracile ont ete aussi detectes dans le poly(dG-dC) apres une irradiation du copolymere. Une des conclusions majeures de ce travail est que l’hydrate de cytosine est relativement stable dans l’ADN a 37°C. De plus, lu decomposition de ce photoproduit s’effectue par desamination, conduisant a la formation de l’hydrate d’uracile. Ce dernier compose peut alors engendrer de l’uracile par deshydratation. La formation cl la stabilite des photohydrates pyrimidiniques dans l’ADN ont pu contribuer, au cours de l’evolution, au developpement de diverses enzymes de reparation dont l’endonuclease III (et des activites enzymatiques analogues chez les organismes eucaryotes) et la glycosylase d’uracile.