青藤碱对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MyD88、TRAF-6表达的影响

目的：探讨青藤碱（Sinomenine,SIN）对TLR信号转导通路及髓样分化因子88（Myeloid differentiation factor88,My D88）、肿瘤坏死因子受体相关因子6（Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6）表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）成纤维样滑膜细胞（Fibroblast-like synoviocytes,FLS）增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法：体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与（0.125、0.25、0.5、1 mmol/L）SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶（ALP）活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6蛋白表达。结果：SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低（P〈0.01）。CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组（P〈0.01）,SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的My D88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：SIN通过对TLR信号转导通路的影响有效地抑制RA-FLS细胞内My D88和TRAF-6的表达,这可能是其治疗RA防止软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形发生的重要分子机制之一。