流式-荧光原位杂交技术在骨髓增生异常综合征患者骨髓CD34+细胞相对端粒长度检测中的应用

本研究旨在初步探讨流式-荧光原位杂交（Flow-FISH）技术在骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓细胞亚群端粒长度测定中的可行性.7例初治低危MDS患者为实验组,7例年龄、性别匹配的营养性贫血患者为对照组.收集肝素抗凝骨髓,以Molt-4细胞株为内对照细胞,以CD34-Alexa Fluor（R）647标记细胞表面抗原,高温变性DNA后与FITC标记端粒探针进行荧光原位杂交,DNA复染后,采用四色流式细胞术检测骨髓有核细胞和CD34＋细胞的相对端粒长度（RTL）.结果显示：实验组和对照组骨髓有核细胞经变性、杂交后,可进行细胞亚群的端粒长度检测.检测结果显示MDS患者骨髓CD34＋细胞RTL显著短于骨髓有核细胞（P =0.001）；与对照组相比,MDS患者骨髓有核细胞RTL及CD34＋细胞RTL均显著缩短（P分别为0.020和0.002）.结论：通过耐热荧光抗体对特定细胞进行标记,Flow-FISH技术可用于细胞亚群RTL检测,值得进一步探索.