Expression of Floral Meristem Identity Gene AP1 in vitro and Validation of Interaction between AP1 and FLC in Brassica juncea Coss. (Mustard): Expression of Floral Meristem Identity Gene AP1 in vitro and Validation of Interaction between AP1 and FLC in Brassica juncea Coss. (Mustard)

芥菜花分生组织决定因子 AP1 与开花路径核心调节子FLC可能存在直接的相互作用，从而调节开花时间。为进一步检测该相互作用，从芥菜“QJ”材料中同源克隆了790 bp的 AP1 cDNA序列，该基因编码256个氨基酸。生物信息学分析表明, AP1属MIKC型蛋白，其MADS域含有2个a螺旋和2个b折叠，第1个a螺旋内含有1个不保守氨基酸位点; 而K域含有3个a螺旋，第1、2个a螺旋内各有1个不保守位点，第3个a螺旋内具有4个不保守位点。同时构建了原核表达质粒pET43.1a-AP1，转化宿主菌大肠杆菌BL21，以IPTG诱导该融合蛋白体外表达。利用pET43.1a-AP1融合蛋白序列中6×His 标签与Ni + 结合的特点，结合SDS-PAGE分析，证实了体外表达蛋白AP1能与FLC相互作用并形成复合体，该结果为深入研究AP1与FLC互作机制及花分生组织的分子调控奠定了基础。