Expression des leucotoxines de Staphylococcus aureus in vitro et in vivo : Impact d'antimicrobiens sur leur expression dans un modèle d'infection expérimentale

Les infections a Staphylococcus aureus (S. Aureus) sont le resultat de l'expression de differents facteurs de virulence : des facteurs d'adhesion aux tissus et aux materiaux, des facteurs d'agression et de contournement des defenses de l'hote. Notre travail a porte sur la mise au point d'une methode d'evaluation de l'expression de facteurs de regulation (agr, sar, sigB), et des leucotoxines de S. Aureus, composees de la leucocidine de Panton et Valentine (LPV), de la gamma-hemolysine (HlgA, HlgB, HlgC), et de LukE-LukD. Ce test de RT-PCR competitive, nous a permis d'obtenir une semi-quantification du nombre d'ARNm par unite formant colonie, variable suivant les leucotoxines, la souche etudiee ou le milieu de culture utilise. Quelle que soit la souche, hlgA est exprimee plus faiblement que les autres leucotoxines. L'expression des leucotoxines est sensible aux mutations dans les genes agr et sar. L'influence de deux classes d'antibiotiques : lincosamines (clindamycine) et fluoroquinolones (moxifloxacine), sur l'expression d'une ou plusieurs leucotoxines a ete etudie in vitro. Celle-ci est reduite en presence de clindamycine. L'expression des leucotoxines dans un modele experimental d'endophtalmie a S. Aureus chez le lapin s'effectue a des densites bacteriennes plus faibles que dans les milieux de culture. La clindamycine presente un passage mediocre dans l'œil. L'etude de la penetration de la moxifloxacine dans l'humeur vitree infectee ou non a montre un bon passage de cette molecule. Les concentrations obtenues sont superieures aux CMI90 de la moxifloxacine actives sur la plupart des pathogenes impliques dans les endophtalmies. L'action dans l'œil infecte de la moxifloxacine sur les bacteries n'entraine pas de stimulation significative de l'expression des leucotoxines ou des facteurs de regulation. Cette methode se revele utile pour l'evaluation des traitements anti-microbiens, afin de determiner leur impact sur l'expression des facteurs de virulence bacteriens.