Avidine recombinante et son utilisation dans la liaison biotine

L'invention concerne une avidine de poulet, un homotetramere liant quatre molecules de biotine, ayant ete convertie sous une forme monomere par mutations successives de residus d'interface en alanine. La principale contribution a la formation monomere etait la mutation de deux residus d'acide aspartique, qui representent ensemble dix interactions de liaison hydrogene a l'interface 1-4. La mutation de ces residus, avec les trois residus hydrophobes a l'interface 1-3, a mene a une formation monomere stable en l'absence de biotine. Par l'ajout de biotine, l'adivine monomere est reassociee au tetramere, qui presentait des proprietes similaires a celles de l'avidine native, en ce qui concerne la liaison biotine, la thermostabilite et la resistance a une protease.