Determination of serum cholesterol by isotope dilution gas chromatography mass spectrometry

目的 建立一种新的同位素稀释-气相色谱-质谱(ID/GC/MS)测定人血清总胆固醇的方法.方法 取一定量的血清样品与[3,4-13C2]-胆固醇内标溶液充分混匀,水解并提取溶液中的胆固醇后,用N,O-二-(甲基硅烷)三氟乙酰胺(BSTFA)衍生胆固醇为三甲基硅烷醚;气相色谱-四极杆质谱(GC/MS)选择检测目标离子.检测标准溶液和血清样品的m/z 368和m/z 370的离子强度并积分,校正标准溶液中天然同位素胆固醇对内标的影响,将校正后的胆固醇和内标的m/z 368和m/z370面积比对胆固醇标准溶液浓度做线性回归.用拟合的回归方程定量血清样品胆固醇浓度.结果 建立的ID/GC/MS测定胆固醇的方法平均批内变异系数0.04%～0.81%.分析美国国家标准物质与技术研究所(NIST)2个浓度水平的标准血清SRM1951a,相对偏差分别是0.19%和0.90%.结论 建立的ID/GC/MS测定胆固醇的方法操作简单、精密,可以用做血清胆固醇的准确定量。