Efeitos da intoxicação e abstinência de etanol sobre os parâmetros neuroinflamatórios em regiões mesencefálicas relacionadas à ansiedade em ratos

O presente estudo teve por objetivo investigar os efeitos da intoxicacao e abstinencia de etanol sobre parâmetros neuroinflamatorios na substância cinzenta periaquedutal dorsolateral (SPCDL) e nucleo dorsal da rafe (NDR) de ratos, bem como avaliar os efeitos da inibicao da oxido nitrico sintase (NOS) sobre a ansiedade decorrente da abstinencia. No primeiro capitulo foram investigados os efeitos da intoxicacao e abstinencia de etanol sobre a ativacao microglial e expressao de NOS induzida (iNOS) na SCPDL e NDR, os niveis de citocinas no mesencefalo e os efeitos da administracao sistemica do inibidor seletivo da iNOS, diidrocloreto de N-([3-(aminometil) fenil] metil) etanimidamida (1400W), sobre o comportamento tipo ansioso na abstinencia de etanol Ratos Wistar machos receberam uma dieta liquida contendo etanol 6-8 % (v/v) por 15 dias como unica fonte de alimento e foram submetidos aos testes comportamentais imediatamente apos ultima exposicao (intoxicado) ou 24 h apos a descontinuacao do etanol (Abst). O grupo controle recebeu a mesma dieta sem etanol, mas acrescida de sacarose para o balanco energetico. Tres dias antes do fim da exposicao a dieta iniciou-se a administracao de salina i.p para os grupos controle e intoxicado; e salina ou 1400W para o grupo abstinente que foi subdividido em 4 subgrupos: Abst+Sal; Abst+1400W 0,75; 1,5 ou 3,0 μg/kg. Os tratamentos continuaram ate o dia dos testes comportamentais os quais foram realizados na caixa claro/escuro e campo aberto. A expressao de OX-42, indicador de ativacao microglial, e de iNOS foi avaliada na SCPDL e NDR por imunohistoquimica e os niveis de citocinas (IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α, IFN-γ e GM-CSF) foram dosados no mesencefalo pela tecnica Luminex xMAP. Os animais abstinentes (Abst+Sal) apresentaram um efeito tipo ansiogenicos comparado com o controle. O tratamento com 1400W 1,5μg/kg diminuiu os efeitos tipo-ansiogenicos da abstinencia de etanol. O grupo intoxicado apresentou um aumento na expressao de OX-42 e iNOS na SCPDL e NDR; enquanto o grupo Abst+Sal apresentou aumento apenas de OX-42 nas duas estruturas, quando comparado com o controle. O tratamento com 1400W nao alterou a expressao de OX-42 ou iNOS comparado com o grupo Abst+Sal. Os niveis de citocinas nao foram alterados em nenhum do grupos experimentais testados. Estes resultados sugerem que a intoxicacao por etanol induz um estado inflamatorio na SCPDL e NDR, o que pode estar relacionado com a manifestacao do comportamento tipo ansioso induzido pela abstinencia. No segundo capitulo foi investigada a hipotese de que o oxido nitrico (NO) na SCPDL estaria envolvido na expressao do comportamento tipo ansioso induzido pela abstinencia de etanol. Ratos Wistar machos receberam uma dieta liquida contendo etanol 6-8 % (v/v) por 15 dias como unica fonte de alimento e seis dias antes do fim da exposicao tiveram uma cânula guia implantada diretamente na SCPDL. Vinte e quatro horas apos o fim da exposicao ao etanol, os animais receberam microinjecoes do sequestrador de NO 2-(4-carboxifenil)-4,4,5,5-tetrametilimidazol-1-oxil-3-oxido (carboxi-PTIO), do inibidor nao seletivo da NOS N-G-nitro-L-arginina metill ester (L-NAME), do inibidor seletivo para NOS neuronial (nNOS) 1-(2-trifluorometil] fenil) imidazol (TRIM), do inibidor seletivo iNOS, 1400W, ou de salina na SCPDL. Dez minutos depois os animais foram avaliados na caixa claro/escuro e campo aberto. Carboxi-PTIO (1 nmol), L-NAME (200 nmol), TRIM (20 nmol), e 1400W (0,3 e 1 nmol) diminuiram os efeitos tipo-ansiogenicos da abstinencia de etanol em ratos avaliados na caixa claro escuro. O precursor de NO L-Arginina reverteu os efeitos do L-NAME. Estes resultados indicam que a producao de NO na SCPDL desempenha um papel na modulacao do comportamento tipo ansioso induzido pela abstinencia de etanol em ratos.