猪流行性腹泻病毒SYBR GreenI荧光定量RT-PCR检测方法的建立
2015
为建立一种快捷、特异、敏感检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法,本研究根据GenBank中登录的PEDV ZKHFQ株的N基因序列的保守区设计一对特异性引物,经过对反应条件进行优化,建立了检测PEDV的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法.该方法对常见的病毒均未检测到荧光信号,而仅对PEDV检测为阳性,其灵敏度为57拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于1%.利用该方法对26份疑似PEDV感染的病料样品进行检测,结果显示本研究所建立的方法对PED的检出率比常规PCR高23.07%.本实验建立的荧光定量RT-PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可以用于临床PEDV的检测.
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