Zika virus : development of novel virus neutralisation test and seroprevalence studies in diverse locations

Ces dernieres annees ont ete particulierement marquees par l’apparition d’epidemies massives de Zika Virus (ZIKV) dans le Pacifique et les Ameriques, qui ont revele des formes rares mais severes d’infection. L’expansion geographique rapide, les formes asymptomatiques frequentes et des symptomes cliniques severes recemment decrits ont augmente l’interet des autorites de sante publique pour l’estimation des taux d’immunite des populations. Cependant, les tests immunologiques les plus couramment utilises pour la detection d’anticorps IgG anti-ZIKV produisent de nombreux resultats faux-positifs, impliquant la necessite de confirmer les resultats. A cette fin, le PRNT est considere comme la reference ; mais il est difficilement utilisable pour de grandes series d’echantillons. L’objectif principal de cette these etait de decrire des tests de neutralisation alternatifs pouvant reduire les difficultes liees au PRNT. Le travail effectue durant cette these peut etre resume en 2 parties: (I) decrire une nouvelle technique de seroneutralisation basee sur la PCR quantitative en temps-reel (PCR-based VNT) permettant une detection sensible, rapide et automatisable. En parallele, un test de seroneutralisation base sur l’effet cythopatique (CPE-based VNT) a ete adapte pour ZIKV. Nous avons montre qu'un criblage de premiere intention utilisant l’ELISA IgG NS1 du Zika associe a la confirmation des non-negatifs par les PCR- ou CPE-based VNT etait tres sensible et specifique compare au PRNT. (II) en utilisant cette methodologie combinatoire, nous avons estime la seroprevalence du ZIKV en Bolivie, en Republique du Congo et au Mali, ou elle etait inconnue.