Caractérisation fonctionnelle de deux facteurs de transcription MYB R2R3 : rôle dans la formation du bois chez les angiospermes

Le xyleme secondaire (appele bois chez les arbres), est un tissu vasculaire caracterise par la presence d'un compose phenolique caracteristique, la lignine qui confere hydrophobicite et resistance mecanique aux parois. La differenciation du xyleme est un processus complexe qui fait intervenir plusieurs centaines de genes dont l'expression doit etre strictement regulee dans l'espace et dans le temps. Cette coordination spatiotemporelle tres fine est assuree au niveau transcriptionnel par des facteurs de transcription. Certains membres de la famille MYB sont par exemple connus pour reguler l'expression des genes de la voie de biosynthese des phenylpropanoides, incluant la lignine. Le but de mes travaux etait de caracteriser fonctionnellement deux facteurs de transcription MYB, EgMYB1 et EgMYB2, isoles a partir d'une banque d'ADNc de xyleme d'Eucalyptus gunnii. La majeure partie de mes resultats concerne la caracterisation d'EgMYB1 qui phylogenetiquement, fait partie du sous-groupe 4 des MYB R2R3. Ce sous-groupe comprend plusieurs represseurs des genes du metabolisme phenolique. Des experiences de co-expression in vivo dans le tabac appuient l'hypothese qu'EgMYB1 pourrait agir en tant que regulateur negatif de l'expression des genes de la voie de biosynthese de la lignine. Ce role potentiel en accord avec l'expression preferentielle d'EgMYB1 dans le xyleme de racines et de tiges d'Eucalyptus a ete verifie in planta chez des peupliers transgeniques. En reponse a la surexpression d'EgMYB1, le contenu en lignine du xyleme secondaire des tiges est reduit. On note egalement une diminution du nombre de fibres de phloeme, et des taux de transcrits des genes de la biosynthese de la lignine. De plus, des analyses transcriptomiques realisees a partir d'ARNs de xyleme et d'ecorce de tiges de peupliers surexprimant EgMYB1 met en evidence des classes de genes sous-exprimes ou surexprimes. De nombreuses similitudes sont retrouvees avec les classes de genes deregulees chez les mutants affectes dans une des etapes de la voie de biosynthese de la lignine, renforcant le role initialement propose pour EgMYB1. Les peupliers surexprimant EgMYB1 montrent egalement d'interessants phenotypes foliaires qui ont ete etudies. La caracterisation fonctionnelle d'EgMYB2 realisee chez des tabacs transgeniques surexpresseurs, nous a amenes a proposer un role d'activateur transcriptionnel de la voie de biosynthese des lignines. Les resultats presentes dans cette these, apportent des indications claires quant aux roles opposes des facteurs de transcription EgMYB1 et EgMYB2 dans la lignification lors de la formation du bois.