pEGFP-mINF-γ转染人卵巢癌细胞SKOV3及其对细胞生长的抑制作用

目的构建绿色荧光蛋白联合γ干扰素（pEGFP-mINF-γ）真核表达质粒,探讨γ-干扰素对卵巢癌细胞系skov3细胞生长的影响。方法将重组质粒转染入卵巢癌细胞株skov3中,获得稳定表达INF-γ细胞株,设空质粒转染组（skov3-pEGFP组）和空白对照组（skov3组）;逆转录聚合酶连反应（RT-PCR）法检测目的基因的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA）方法测定INF-γ的分泌量;四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法和荧光显微镜下细胞染色法检测INF-γ对skov3细胞体外生长和凋亡等生物学行为的影响。结果RT-PCR和ELISA法证实重组质粒已整合到skov3细胞并获稳定表达;MTT法检测细胞的增值速度及细胞抑制率,pEGFP-mINF-γ组第5天的细胞抑制率为21.67%,明显高于skov3-pEGFP和skov3组,P〈0.005;Hoechst染色检测结果显示skov3-mINF-γ组细胞凋亡,荧光显微镜下skov3-mINF-γ组凋亡细胞明显多于skov3-pEGFP组和skov3-nul组,差异有统计学意义（P〈0.05）,skov3-pEGFP组和skov3组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论成功构建真核表达质粒pEGFP-mINF-γ,该质粒转染人卵巢癌细胞sk-ov3可抑制其生长,并不影响INF-γ的分泌量,异种INF-γ基因可能对人上皮性卵巢癌起重要作用。