Expressão do inibidor proteico da sintase neuronal do oxido nitrico (PIN) e moleculas relacionadas, da ontogenese ao envelhecimento do cerebelo humano

o PIN e a proteina inibidora da sintase neuronal do oxido nitrico (nNOS). O mecanismo de regulacao ocorre pela interacao do PIN com a nNOS, inibindo sua dimerizacao, dissociando os dimeros ja formados e assim inibindo a formacao da enzima ativa. O PIN e uma proteina de 10 kDa e 89 residuos de aminoacidos altamente conservada na natureza. O PIN humano apresenta 100% de homologia com a cadeia leve da dineina (DLC) humana. A DLC esta envolvida na modulacao da atividade transcional do NFkB. A dineina esta envolvida em uma variedade de processos de motilidade intracelular, incluindo divisao celular, trafego de vesiculas membranosas e outras particulas intracelulares. A interacao de PIN com multiplas proteinas e sua alta conservacao evolutiva sugerem que o PIN possa ser um importante regulador de varios processos fisiologicos. O oxido nitrico (NO) atua como um mensageiro nao convencional nos sistemas vascular, imune e nervoso. O modelo corticogenese cerebelar humana e relativamente bem conhecido e permite correlacionar eventos morfogeneticos e bioquimicos/moleculares. Observamos que a expressao imunohistoquimica de PIN/DLC e nNOS no cerebelo humano e desenvolvimento-dependente. Durante a ontogenese estas moleculas ocorrem em regioes proliferativas, como a EGL e a zona ventricular, no nucleo e citoplasma das celulas. Celulas com aspecto migratorio foram imunomarcadas para PIN, DLC e nNOS no nucleo e no citoplasma. Este resultado e inedito, e nao encontramos relatos semelhantes na literatura. Os interneuronios e as celulas de Purkinje expressaram PIN e DLC, principalmente no nucleo celular, desde o surgimento ate 98 anos. E a imunodeteccao de nNOS nos interneuronios e celulas de Purkinje foi observada principalmente no citoplasma e ramificacoes dendriticas em todas as idades observadas. A camada granular interna expressou PIN, DLC e nNOS em todo o periodo estudado. Detectamos imunorreatividade para PIN e DLC nas celulas ganglionares do nucleo denteado, principalmente no nucleo celular, e para a nNOS principalmente no citoplasma, desde a ontogenese ate o envelhecimento do cerebelo humano. Nossos resultados imunohistoquimicos foram validados pela deteccao de PIN, DLC, DIC e nNOS em amostras cerebelares obtidas de pacientes de 6, 16, 23, 47, 68 e 82 anos de idade usando Western bloting Abstract