UII/UT系统在LPS刺激大鼠肝枯否细胞前炎细胞因子TNF-α和IL-1β表达与分泌中的作用研究

目的探讨UⅡ/UT系统在LPS刺激大鼠肝枯否细胞（Kupffer cell,KC）TNF-α和IL-1β表达和分泌中的作用。方法采用胶原酶灌注消化和密度梯度离心分离大鼠KC。细胞分组和处理方法：正常对照组urantide（-）LPS（-）、urantide或UⅡ处理组urantide/UⅡ（＋）LPS（-）、LPS刺激组urantide（-）LPS（＋）、urantide或UⅡ预处理组urantide/UⅡ（＋）LPS（＋）;细胞内基因表达采用RT-PCR和real-time PCR方法检测,细胞培养上清液中蛋白质分泌水平采用ELISA分析方法检测。结果 LPS刺激后,KC内UⅡ、UT mRNA相对表达水平和细胞培养上清液UⅡ多肽水平显著升高,但urantide预处理组显著低于LPS刺激组（P〈0.01）。Urantide处理组细胞UⅡ/UT mRNA和上清液UⅡ多肽水平与正常对照组之间无明显统计学差异（P〉0.05）;LPS刺激后（LPS刺激组、UⅡ预处理组和urantide预处理组）,TNF-α和IL-1βmRNA表达和蛋白质分泌水平较正常对照组明显升高（P〈0.01）,但urantide预处理组较LPS刺激组和UⅡ预处理组显著降低（P〈0.01）,LPS刺激组与UⅡ预处理组之间无明显统计学差异（P〉0.05）。UⅡ或urantide处理组KC上述前炎细胞因子的表达和分泌水平与正常对照组之间无明显统计学差异（P〉0.05）。结论 UⅡ/UT信号系统可能在LPS刺激肝KC前炎细胞因子TNF-α和IL-1β的表达和分泌中起重要作用。