LC-MS/MS法测定大鼠脑组织中奥拉西坦的浓度

目的建立一种简便、快速的LC-MS/MS法测定大鼠脑组织中奥拉西坦的浓度，并对SD大鼠静脉注射奥拉西坦后的脑组织分布进行研究。 方法SD大鼠脑组织样品用0.9%氯化钠溶液匀浆后，以吡拉西坦为内标，用乙腈沉淀蛋白，采用LC-MS/MS系统进行分离和测定。色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB-C18柱（100 mm×4.6 mm，2.7 μm），流动相为30%甲醇-70%水（含10 mmol·L-1甲酸铵，0.1%甲酸），流速为0.2 mL·min-1，柱温为30℃。质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子模式，多反应离子监测（MRM），检测离子为奥拉西坦m/z 158.6→ 113.6，内标吡拉西坦m/z 142.6→125.4。SD大鼠分别单次静脉注射奥拉西坦500、1 000、2 000 mg·kg-1，于不同时间点分别采集脑组织，测定脑组织中奥拉西坦的浓度。 结果SD大鼠脑组织匀浆液质量浓度在1.0~100.0 μg·mL-1范围内线性关系良好，定量下限为1.0 μg·mL-1，批内和批间精密度RSD均小于5.7%，准确度为96.3%~105.2%。大鼠分别单次静脉注射500、1 000、2 000 mg·kg-1 3个剂量的奥拉西坦后，主要药动学参数t1/2分别为（3.56±0.27）h、（3.36±0.49）h、（3.60±0.79）h，Cmax分别为（24.78±16.06）μg·g-1、（50.79±25.92）μg·g-1、（82.21±19.33）μg·g-1，MRT0-t分别为（2.54±0.02）h、（2.38±0.30）h、（2.57±0.08）h，AUC0-t分别为（48.59±10.92）μg·h·g-1、（94.54±9.30）μg·h·g-1、（201.35±18.87）μg·h·g-1。 结论本测定方法可用于大鼠奥拉西坦药代动力学在脑组织中的分布研究；大鼠分别单次静脉注射3个剂量的奥拉西坦后，奥拉西坦进入脑组织的时间较快，浓度较高，持续时间较长，利于发挥活化和改善脑组织功能的作用。