MiRNA-142-5p在大鼠角膜新生血管中的作用及机制研究

目的 观察microRNA-142-5p(miRNA-142-5p)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization，CorNV)的作用及其与VEGF/PI3K/AKT通路的关联情况。 方法 角膜缝线法诱导SD大鼠右眼CorNV作为实验组，左眼作为对照组。取缝线后第7天的角膜进行实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR，RT-PCR)检测miRNA-142-5p以及VEGF mRNA的表达水平。将miRNA-142-5p mimic转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs), RT-PCR检测miRNA-142-5p的表达量来验证转染是否成功。并通过RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HUVECs中VEGF及PI3K/AKT mRNA和蛋白的表达量。分别用Transwell、CCK-8法及Matrigel胶管腔形成实验检测HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力。 结果 成功建立CorNV模型。RT-PCR结果显示7 d组miRNA-142-5p(6.799±1.683)和VEGF(3.297±0.334)的表达量较正常角膜组(normal)显著升高( P P P P 结论 CorNV中miRNA-142-5p及VEGF的表达明显上调，过表达miRNA-142-5p可以显著提高HUVECs中VEGF及PI3K/AKT通路各主要成员mRNA和蛋白的表达水平，进而促进HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力。表明miRNA-142-5p可通过PI3K/AKT通路参与CorNV的调控。