ImmunoAIF△1-480融合蛋白对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用

目的：观察免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞的杀伤作用。方法：利用PCR的方法将九聚精氨酸编码序列（R9）与AIFC-末端结构域编码区重组,然后将R9-AIF△1-480基因与pCMV-e23sFv载体重组,构建免疫促凋亡分子ImmunoAIF△1-480真核表达载体。用脂质体法转染CHO细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞株,通过RT-PCR、Westernblot、流式细胞术（FCM）等方法检测重组基因在转染细胞中的表达及其对HER2阳性肿瘤细胞的特异性杀伤活性。结果：经过酶切鉴定与测序证实,带有Im-munoAIF△1-480基因的真核表达载体构建成功,经RT-PCR、Westernblot可检测到培养上清中免疫促凋亡基因的表达,用FCM检测发现融合蛋白ImmunoAIF△1-480对HER2阳性肿瘤细胞SGC-7901和SKBR-3有明显的促凋亡活性,而对不表达HER2分子的ECV-304细胞几乎没有影响。结论：Immuno-AIF△1-480可以特异性杀伤HER2阳性肿瘤细胞。