Anti-CD20scFv/IgGFc/CD80/CD28/zeta转染人T淋巴细胞对原代CLL细胞的作用

目的：将已成功构建表达anti-CD20scFv/CD80/CD28/zeta转染人T淋巴细胞,体外观察该类细胞特异性清除CD20＋原代慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞的能力,为肿瘤的过继免疫治疗提供新思路。方法：将本室成功构建的含anti-CD20scFv/IgGFc/CD80片段的PLNCX质粒,转染PA317包装细胞,挑取高滴度的包装细胞株收获逆转录病毒,用收获的病毒感染刺激分裂的人外周血T细胞,经G418筛选后与CD20＋原代CLL细胞在体外共同培养,在显微镜下观察CD20＋的原代CLL细胞生长状态,ELISA检测试剂盒检测T细胞分泌细胞因子的功能。结果：重组基因修饰的T细胞能在体外杀伤CD20＋原代CLL细胞,而对CD20-细胞无杀伤作用;同时靶细胞为CD20＋组上清液中IL-2（1301.00pg/ml）和IFN-γ（602.18pg/ml）水平与CD20-组相比明显升高。结论：嵌合锚定T细胞能够成功构建;该类T细胞在体外能特异性杀伤CD20＋的原代CLL细胞。