HIV-1 DNA real-time PCR检测方法的建立及初步应用

目的建立HIV-1DNA的实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测方法。方法根据HIV-1NL4-3LTR基因及人CCR5基因序列设计引物,构建质粒标准品,建立绝对定量检测方法,对检测方法的重复性和特异性进行评价。用该方法对20例HIV-1感染者HIV-1DNA进行定量检测。结果构建了HIV-1DNA绝对定量的标准品质粒,标准曲线的相关系数在0.99以上,重复性试验中变异系数小于3%,检测下限为1×103拷贝/μl。20例HIV-1感染者样品中,14例样品检测到HIV-1DNA,检出率为70%。结论 HIV-1DNA real-time PCR检测方法具有快速、特异性强和稳定性好等优点,为进一步研究HIV-1DNA与疾病进程的关系和评价抗病毒疗效等方面奠定了基础。