Detection the human mitochondrial DNA 4977 bp deletion induced by 60 Co γ-rays in vitro by nest-PCR

目的 探索对不同剂量电离辐射诱导的人外周血线粒体DNA 4977 bp缺失进行分析的方法.方法采用3对引物对γ射线诱导的人外周血线粒体DNA缺失进行PCR扩增,建立对人线粒体DNA 4977 bp缺失进行分析的巢式PCR方法,扩增线粒体DNA缺失区片段,纯化PCR产物进行测序.采集5例正常人外周血进行0～5Gy60Co γ射线的外照射,利用巢式PCR技术,分析60Co γ射线照射后外周血有核细胞中线粒体DNA4977bp缺失的发生情况.结果用建立的巢式PCR方法可在受到照射的外周血样品中检测到mtDNA 4977 bp缺失.所有外周血样本在照射前均无线粒体DNA 4977 bp缺失,1～5 Gy 60Co γ线照射后均诱导出此缺失.结论本研究所建立的巢式PCR方法可用来分析电离辐射诱导的人外周血淋巴细胞线粒体DNA4977bp缺失。