LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中泼尼松的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）方法，测定Beagle犬血浆中泼尼松的浓度，并运用该方法研究泼尼松控释片在健康Beagle犬体内的药代动力学行为。 方法样品预处理采用沉淀蛋白法，内标物为洛索洛芬；采用Venusil ASB C18（2.1 mm×50 mm，3 μm）色谱柱，以甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为0.2 mL·min-1。离子源为ESI源，采用负离子检测方式，以多反应离子监测（MRM）扫描方式进行检测，检测离子为m/z 357.1→m/z 327.1（泼尼松，待测物），m/z 245.0→m/z 83.0（洛索洛芬，内标物）。6只Beagle犬餐后0.5 h口服给予泼尼松控释片1片（5 mg），于不同时间点分别采集静脉血，测定口服给予泼尼松控释片后Beagle犬血浆中泼尼松的浓度。 结果犬血浆中泼尼松质量浓度在1.00~50.0 μg·L-1范围内线性关系良好，定量下限为1.00 μg·L-1，日内和日间精密度的RSD≤8.9%，平均提取回收率在76.4%~87.5%之间，内标的提取回收率为90.6%，基质效应在87.1%~95.9%之间，内标基质效应为105.5%； 结论Beagle犬口服泼尼松控释片5 mg后，主要药动学参数t1/2为（1.60±0.52）h，ke为（0.47±0.15）h-1，Cmax为（22.0±2.80）μg·L-1，Tmax为（5.8±0.3）h，AUC0-16 h为（93.5±12.7）μg·h·L-1。本文建立的方法可用于泼尼松在Beagle犬体内药代动力学行为的研究。