Influência da fonte de carbono na produção de fruto-oligossacarídeos, na composição da parede celular e na expressão de genes relacionados à sua biossíntese em Fusarium solani (Mart) Sacc. e Neocosmospora vasinfecta E. F. Sm

Fruto-oligossacarideos (FOS) sao frutanos de baixo peso molecular produzidos por microorganismos. O interesse em FOS vem aumentando uma vez que eles sao considerados ingredientes funcionais beneficos a saude humana. Com o objetivo de analisar como a producao de FOS e a composicao da parede celular de fungos filamentosos e afetada pela fonte de carbono, os fungos Fusarium solani (URM 3338) e Neocosmospora vasinfecta (URM 3329) foram cultivados em meios contendo cinco fontes de carbono diferentes (sacarose, inulina, glucose, frutose ou glucose mais frutose, todos a 1%) e coletas foram realizadas aos 5, 10 e 15 dias de crescimento. A partir do meio de cultivo filtrado foram analisados o pH, teores de acucar total, acucares redutores e proteinas, a presenca de FOS e atividades enzimaticas invertasica e inulinasica. A partir do micelio, a biomassa foi quantificada e a parede celular foi isolada e sua composicao em acucares neutros, acidos uronicos e quitina analisada. Foi avaliada tambem a expressao relativa de genes de sintese de parede celular b-1,3-glucano sintase e quitina sintases. Os dois fungos utilizaram todas as fontes de carbono crescendo nas diferentes condicoes. Atividade de hidrolise foi detectada no meio contendo sacarose ou inulina para o fungo F. solani, gerando glucose, frutose e fruto-oligossacarideos como produtos havendo utilizacao dos monossacarideos. O micelio deste fungo apresentou alteracoes visiveis no crescimento em meio solido apenas no meio com frutose, mas foi observada igual quantidade de quitina da parede celular deste fungo quando crescido por cinco dias em sacarose e inulina, mas em menor quantidade com relacao aos demais meios. As analises de expressao relativa de genes mostraram inducao do gene da b-1,3-glucano sintase e repressao do gene quitina sintase 5 em sacarose e inulina com relacao a condicao frutose. Estes dados sugerem que a alteracao na composicao da parede celular do F. solani pode ter relacao com a secrecao de enzimas nos meios sacarose e inulina. Para N. vasinfecta, quando crescido em sacarose foi observada atividade de transfrutosilacao, com a liberacao de glucose e sintese de 1-cestose (FOS) no meio. Transfrutosilacao tambem foi observada no meio que teve inulina como fonte de carbono. O micelio deste fungo apresentou alteracoes visiveis em meio solido nas condicoes frutose e inulina, sendo mais hialino do que nas demais condicoes. A quantidade de quitina na parede celular deste fungo crescido por cinco dias foi maior nas condicoes frutose e inulina com relacao as demais. As analises de expressao relativa de genes mostraram inducao dos genes de quitina sintase 4 e 5 nestas duas condicoes em relacao a sacarose. A partir dos resultados, pode-se concluir que as fontes de carbono oferecidas foram utilizadas pelos fungos, que as mesmas afetaram a composicao de acucares da parede celular e a expressao de genes de sintese de componentes da parede e que estes fungos sao promissores para a producao de FOS, pois possuem enzimas que hidrolisam a inulina, alem de enzimas que sintetizam oligossacarideos a partir de sacarose por transfrutosilacao. Abstract