沉默RRM1可逆转乳腺癌细胞MCF-7/R对紫杉醇的耐药性

目的阐明沉默核苷酸还原酶M1亚基(RRM1)对乳腺癌耐药细胞MCF-7/R逆转耐药的作用。 方法通过高浓度紫杉醇诱导耐药株MCF-7/R; 运用Kaplan-Meier Plotter绘制RRM1基因的生存曲线; 通过siRNA沉默MCF-7/R细胞中RRM1基因表达, 并用Western blot和qRT-PCR方法检测蛋白和基因水平的表达, 筛选出高效特异的si-RRM1序列; 将该si-RRM1序列转染MCF-7/R细胞, 筛选得到能稳定抑制RRM1基因表达的细胞株MCF-7/R/siRNA; 四甲基偶氮唑盐(MTT)法和5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测RRM1沉默后MCF-7/R细胞增殖能力的变化; 流式细胞术检测细胞周期和凋亡, 并观察周期、凋亡相关蛋白的变化; 构建裸鼠皮下移植瘤模型, 观察沉默RRM1后给予紫杉醇治疗对裸鼠体内抑瘤效果的影响。 结果生存曲线分析显示RRM1基因表达与乳腺癌患者的生存率呈负相关( P =0.000); MCF-7/R细胞中证实RRM1蛋白和mRNA表达水平较MCF-7细胞均显著升高( P P P P P 结论沉默RRM1可通过诱导细胞凋亡增加提高MCF- 7/R细胞化疗敏感性, 逆转乳腺癌紫杉醇化疗耐药。