[Effects of Transcription Factor MZF-1 on Transcriptive Regulation of Acute Monocytic Leukemia-related Gene MLAA-34].

题目: 转录因子MZF-1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控研究. 目的: 探讨转录因子MZF-1对急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34的转录调控作用. 方法: 利用双萤光素酶报告基因检测系统及定点突变技术分析MZF-1 对MLAA-34基因启动子转录活性的影响。通过凝胶电泳迁移率变动检测（electrophoretic mobility slift assay,EMSA）和染色质免疫沉淀检测（chromatin immunoprecipitation,ChIP）实验，验证MZF-1是否与MLAA-34启动子核心区直接特异性结合。构建MZF-1真核表达载体和干涉载体，转染U937细胞，应用RT-PCR 和Western blot法检测MLAA-34基因的转录和表达变化. 结果: 转录因子MZF-1对MLAA-34基因表达具有调控作用，MZF-1结合序列点突变后，相对荧光素酶活性降低（P<0.01）。EMSA和ChIP实验从细胞内、外水平分别证明MZF-1可与MLAA-34启动子直接结合而发挥调控作用。在过表达试验中，MZF-1的增加可上调MLAA-34的表达（P<0.05）；在干涉试验中，MZF-1的降低可下调MLAA-34的表达（P<0.05）. 结论: 转录因子MZF-1可与MLAA-34基因启动子上的转录调控区结合，并促进急性单核细胞白血病细胞中MLAA-34基因的转录.